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32 Cards in this Set
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¿cuáles son los métodos de Instrumentación y tecnología para el estudio de la célula?
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1- Métodos de análisis estructural
2- Métodos de observación directa de células y tejidos 3- Fraccionamiento celular y análisis de sus moléculas 4- Tecnología del DNA recombinante. |
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Describa los Métodos de análisis estructural
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– Análisis microscópico
• microscopio óptico • microscopio electrónico • criofractura – Preparación de tejidos para microscopía. Técnica histológica – Métodos histoquímicos e inmunocitoquímicos – Hibridación in situ – Autorradiografía |
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¿que es el límite de resolución (ejemplos) y la fórmula de abbe?
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Límite de resolución: – distancia mínima entre dos puntos para que puedan distinguirse como tales.
Ejemplos: – Humano: 0,23 mm – Microscopio óptico: 240 nm – Microscopio electrónico: 0,3 nm Fórmula de Abbe: LR=0,61 x longitud de onda / AN • AN (Apertura Numérica) = n x senα – n: índice de refracción del medio entre objeto y lente » aire: 1 » aceite de inmersión: 1,51 – α: ángulo de semiapertura de la lente |
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dibuje un microscópio y nombre sus partes.
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¿cuales son los tipos de microscopio optico segun diferencias de aumento de contrastes?
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Contraste de fases
Contraste interferencial (Normarski) campo claro campo oscuro |
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explique el microscopio optico de fluorescencia.
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explique el microscopio confocal.
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elementos básicos del microscopio electrónico.
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explique el m. electronico de barrido
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explique el m. electrónico de transmisión.
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explique la criofractura.
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se trata de una técnica usada en microscopía electrónica por el cual se consigue partir la célula justo por la región hidrofóbica de la bicapa lipídica, obteniéndose muestras en las que es posible observar las proteínas y demás estructuras que en ella se encuentran. Para ello se somete a la muestra a un rápido proceso de congelación en nitrógeno líquido tras el cual se produce el corte o fractura.
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explique los pasos para preparar una muestra para microscopía.
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fijación (métodos)
inclusión (concepto y materriales)( estufa para inclusion en parafina) corte (concepto y tipos) (microtomo de rotación, ultramicrotomo, criostato: criostato Aparato utilizado en anatomopatología que consiste en un microtomo especial utilizado para congelar y obtener posteriormente cortes de tejido para ser estudiados. tinción. (procedimientos fisico-químicos - histoquímica - (inmunohistoquímica) - (hibridación in situ) |
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explique el procedimiento de preparación de muestras para MET.
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Enumere los métodos de tinción convencionales.
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Hematoxilina-eosina (H-E)
Mallory-azán Orceína Van Gieson |
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enumere los métodos histoquímicos
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PAS (Carbohidratos)
Sudán (lípidos) Hierro coloidal Feulgen (DNA) |
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explique los métodos inmunocitoquímicos (método directo e indirecto)
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explique la hibridación in situ
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- se basa en la capacidad que tienen los ácidos nucleicos de hibridarse (unirse las monocademas que tienen secuencias de bases complementarias)
- se utilizan sondas con una secuencia de bases conocida. Las sondas están marcadas (en el caso de la figura es fluorescente: FISH) - sirven para demostrar las secuencias de ácidos nucleicos correspondiente a determinados genes |
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explique la autorradiografía
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¿Cuáles son los Métodos de observación directa de células y tejidos?
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– Cultivo de células y tejidos
– Manipulación de células vivas – Separación de células |
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explique el Cultivo de células y nombre algunas líneas celulares usadas actualmente.
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- permite estudiar in vivo poblaciones celulares fuera del organismo - categorías: - cultivo de células - cultivo de tejidos - cultivo de órganos - medios de cultivo - clon celular - cultivos primarios y secundarios - líneas celulares - células híbridas
Primer cultivo de células lo realizó George Gey, de la Johns Hopkins University, en 1951, con células provenientes de un tumor maligno de Henrietta Lacks (células HeLa). La cepa se sigue usando hoy día en laboratorios de todo el mundo |
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¿qué son las células híbridas?
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¿qué es la manipulación de células vivas?
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- tinciones vital y supravital - azúl tripán: estudio de fagocitosis - rojo neutro y verde Jano: estudio de leucocitos - micromanipulación mecánica
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¿qué es la separación de células?
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¿cuales son los métodos de Fraccionamiento celular y análisis de sus moléculas?
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– Centrifugación diferencial
– Separación de proteínas mediante cromatografía – Determinación del tamaño y subunidades proteicas mediante electroforesis |
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¿qué es la centrifugación diferencial?
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El precipitado difiere en cada fracción:
- núcleo (fracción nuclear) - mitocondrias, lisosomas, peroxisomas (fracción mitocondrial) - “microsomas” y pequeñas vesículas (fracción microsomal) - ribosomas, grandes moléculas (fracción ribosómica) |
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que es la Cromatografía ?
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- variedad de técnicas que separan moléculas al desplazarse éstas en una matriz porosa - los componentes se separan en función de la diferente solubilidad relativa en el solvente
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explique la Electroforesis en gel de poliacrilamida
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- se puede determinar el tamaño y la composición de subunidades de una proteína
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explique la Tecnología del ADN recombinante
Métodos y técnicas, Aplicaciones básicas y Aplicación médica |
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explique la Clonación del ADN
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- sirve para producir grandes cantidades de un segmento de ADN específico
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¿que son los ratones transgénicos?
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Ratones transgénicos (knockout) - carecen de un gen funcional que normalmente contienen - obtención tras un proceso complicado - gran utilidad en: - estudio de las bases genéticas de enfermedades humanas - conocimiento de procesos celulares en los que participa el producto de un gen determinado
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¿que es la Amplificación de ADN por PCR? ¿cuales son sus usos clínicos?
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- se sintetizan grandes cantidades de ADN a partir de una única molécula de ADN - diagnóstico muy sensible en pruebas de genética humana y en infecciones
Usos clínicos PCR: - Identificación agentes infecciosos (v.g. HPV ) - Identificación mutaciones - pacientes subfértiles - candidatos a ICSI microdeleción del Y por PCR |
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que son los microarrays o biochips
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• Permiten investigar cientos o miles de genes en un experimento • Aplicaciones: – Correcta clasificación de tumores – Farmacogenómica
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