Use LEFT and RIGHT arrow keys to navigate between flashcards;
Use UP and DOWN arrow keys to flip the card;
H to show hint;
A reads text to speech;
25 Cards in this Set
- Front
- Back
|
Cytométrie de flux ou FACS permet de |
Caractériser des cellules individuelles Analyser bcp de cellules par seconde |
|
|
Systèmes du cytometre |
Fluidique Optique Électronique |
|
|
Système fluidique |
Béquet central vibre Cellules emportées par le liquide accéléré |
|
|
Système optique |
FL = fluorescence de la cellule FSC et SSC = paramètres de dispersion |
|
|
Fluorescence permet |
Marquer cellules, adn, arn, fonction cellulaires |
|
|
SSC permet de mesurer |
Side scatter : mesure aux petits angles Mesure la taille de la cellule |
|
|
FSC permet de mesurer |
Forward scatter : mesure aux grands angles La granulosité de la cellule |
|
|
Techniques de marquage cellulaire |
Direct Indirect Système avidine biotine |
|
|
Direct |
Anticorps primaire marqué |
|
|
Système avidine biotine |
Avidine sur un anticorps, reconnue par la biotine (vitamine) Très forte affinité |
|
|
Exemples de fluorochrome |
PE : orange t FITC: vertPerCP : rouge PerCP : rouge |
|
|
Indirect |
Anticorps primaires reconnus par anticorps secondaires marqués => signal plus intense |
|
|
Représentation des resultats |
1 ou 2 paramètres, 2 c'est mieux |
|
|
Étapes de l'apoptose |
-Rétrécissement de la cellule -Densité cytoplasmique augment -Compaction de la chromatine -Ségrégation en compartiments s'appuyant sur l'enveloppe nucléaire -formation de saillies en forme de cloques -separation et formation des corps apoptotiques => Phagocytose en même temps donc pas d'inflammation |
|
|
Nécrose |
Gonflement, organites endommagés chromatine altérée, tout est détruit et le contenu cellulaire est dispersé => inflammation |
|
|
Détection de l'apoptose via eat-me |
Scamblase de la MP fait que la PS se retrouve a l'extérieur PS chargé négative Annexine 5 reconnaît ça => eat-me |
|
|
Détection de la nécrose |
Iodure de propidium (PI) est lipophobe, peut rentrer dans la cellule car la MP se dégrade et se fixe entre les bases azotés |
|
|
Détection de l'apoptose via TUNEL |
Clivage de l'ADN par la nuclease laissant un 3'OH libre, marquage sur ceux ci |
|
|
Fragmentation de l'adn |
Clivage internucleosomal En barreau d'échelle (n fois 150 pdb) sur une électrophorèse |
|
|
Les caspases permettent |
Induction de l'apoptose |
|
|
Procaspase |
Précurseur inactif composé de 4 sous unités : 2 p20 (grande) et 2 P10 (petite) |
|
|
Caspase active |
Clivage sur les Asp de la procaspase |
|
|
Premier clivage de la première procaspase |
Procaspase faiblement active donc si on approche deux procaspase suffisamment, elles peuvent se cliver mutuellement, ça lance la cascade de caspases |
|
|
Fragmentation de l'ADN effectué par |
Protéine CAD |
|
|
Activation de CAD |
Caspase3 va venir cliver le complexe CAD-iCAD et dégrader iCAD, du coup CAD est activé et peut faire le clivage internucleosomal |
