Use LEFT and RIGHT arrow keys to navigate between flashcards;
Use UP and DOWN arrow keys to flip the card;
H to show hint;
A reads text to speech;
33 Cards in this Set
- Front
- Back
|
Vad är genteknik? |
Man förändrar arvsanlagen hos bakterier, växter etc. genom att göra ingrepp i generna Analysera: metoder för att bättre förstå genetiken, ex sekvensering och PCR Förändra/manipulera genomet: påverka och ändra i genomet, överföra gener, genkloning, modifiering av gener |
|
|
Definiera bioteknik, ge exempel på områden det används inom |
En kombination av biologi och teknik, använder celler eller cellkomponenter (enzymer, DNA) i tekniska tillämpningar Används inom b.la: Läkemedel och medicin Agrobioteknik (växtförädling) Miljöbioteknik (vattenrening, avfallshantering, biobränslen) Biotekniska livsmedel (bröd, öl, vin) |
|
|
Vad kan man göra med DNA? |
Isolera Karakteriseras; DNA sekvensering Tillverkas; artificiellt Förändras; in vitro mutagenes, CRISPR/Cas9 Överföras Uttryckas Mångfaldigas; klonas, PCR Detekteras |
|
|
Hybrid (rekombinant) DNA teknik |
Gör det möjligt att fritt flytta gener mellan levande organismer (genkloning) |
|
|
Syftet med genkloning |
Amplifiera och isolera ett specifikt DNA som kan analyseras vidare Från ett specifikt DNA kunna analysera det protein som uttrycks |
|
|
Hur kan genkloning genomföras? Vilka komponenter behövs? |
Restriktionsenzym; klipper DNA vid specifika nukleotidsekvenser Fragmentet av DNAt sätts in i en vektor/plasmid Det rekombinanta DNA fragmentet kan då kopieras ingen värdcell Kopiering av det rekombinanta DNAt Förökning av värdcellen Bildande av kloner av identiska värdceller som bär den inklonade genen |
|
|
Vad gör att bakterier ej för främmande DNA mellan olika bakteriearter? Samt att bakteriens DNA skyddas mot restriktionsenzymer? |
Finns en naturlig funktion i bakterier = främmande DNA sprids ej mellan olika bakteriearter Bakteriens DNA skyddas genom att den specifika sekvensen är modifierad |
|
|
Vilka olika klasser av restriktionsenzymer finns? Vad är specifikt för dessa? |
Typ I och III: komplexa, saknar specifika klyvningsställen, används ej inom genteknik Typ II: "klippenzymer", de klipper vid specifika sekvenser (som kan variera i längd) , mycket viktiga |
|
|
Hur namnges restriktionsenzymer? |
Första bokstaven från genus och två följande från speciesnamn Ex; Klebsiella pneumoniae: Kpn I |
|
|
Hur klipper restriktionsenzymer? |
De klipper båda strängarna av DNA dubbelhelixen Målsekvenserns för RE är oftast kortare Enzymen klipper "blunt end" eller "sticky end" (Enzymet tillsätts sist i reaktionen, temperatur 37 grader, specifik buffert för resp. enzym) |
|
|
Vad är DNA ligas? |
Det är ett enzym som kan binda samman två DNA fragment (energikrävande) Även DNA fragment som klippts av RE kan sammanfogas, kräver dock DNA polymeras och dNTPs för att fylla i de nukleotider som saknas |
|
|
Ge exempel på olika kloningsvektorer |
Plasmid: naturliga och kommersiella, uttrycks främst i bakterier men även i jäst Bakteriofag: virus som specifikt infekterar bakterier Cosmid: skapad genom kombination av fag och plasmid. Kan bära stora DNA fragment |
|
|
Vilka krav finns det på kloningsvektorer för att de ska kunna användas? |
Vektorn ska kunna replikera sig i värdcellen och kunna överföras till dotterceller Kloningsvektorer bör vara relativt liten (<10 kb), men kan vara mellan 1 kb - >250 kb |
|
|
Vad är gemensamt för cirkulära kloningsvektorer? |
Multiple cloning site: kloningssite med olika restriktionsite. Här kan DNA-fragment klippas in mha RE Origin of replication: replikationsstart Selektionsmarkör: ex. antibiotikaresistens |
|
|
Nämn de 2 olika plasmiderna för genteknik |
Kloningsplasmid (högre kopietal) : kloning av genfragment Expressionsplasmid (lägre kopietal) : plasmider där den inklonade genen kan uttryckas och bilda genprodukt Utvecklade från kloningsplasmider Ska innehålla promotor, ribosomimbindningssite och terminator |
|
|
Beskriv de 2 sätten att transformera in en plasmid i en bakterie |
Kemisk transformering; med eller utan värmechock. Värmechock: (bakterier + plasmid blandas på is, värmechock 42 grader under 30-90 sekunder. Ca2+ med värmechock löser upp bakteriens cellvägg och plasmidvektorn kan tränga in Elektroporering: skapar små hål i cellmembranet där plasmid kan tränga in Fenotypisk expression: 37 grader ca 1 h Efter transformering: bakterierna sprids ut på petriskål med selektivt cellmedium, får växa i 37 grader |
|
|
Vad är en episom? |
En plasmid vilken interageras i bakteriens genom |
|
|
Selektionsmarkörer |
Ex. mot antibiotika, om en bakterie-klon ej uttrycker plasmid kan dessa selekterad bort genom att tillsätta specifikt antibiotika |
|
|
Hur sker en positiv selektion (selektionsmarkörer)? |
Plasmider som uttrycker LacZ, bryter ner X-gal substrat på platta till blåfärgad produkt. Om DNA-fragmentet klonats in i vektorn = LacZ genen förstörs = vita rekombinanta kloner selekteras |
|
|
Hur är en bakteriofag uppbyggd? |
Enkel struktur med DNA (eller RNA), vilket är omgett av en skyddande kapsid (av proteiner) Huvud och svans, filamentiösa |
|
|
Hur fungerar lytiska fager? |
Värdcellen lyseras när nya fager frigörs 1. Fag fäster på utsidan av värdcellen = injicerar nukelinsyra 2. Fag DNA replikeras och nya fagkapsider syntetiseras 3. Fager sätts samman, frisätts från bakterien |
|
|
Hur fungerar lysogena fager? |
Fag DNA blir kvar i värdcellen, kan integreras i arvsmassan som proffs Kan övergå i lytisk fas Exempel M13 fagen: Injektion av M13 DNA i e-coli via pili (först ssDNA, konverteras till dsDNA) Från dsDNA kan det bildas ssDNA, packas i mogna fagpartiklar. Avges från cellen. Celldelning; kopior följer med till dottercellerna |
|
|
Hur fungerar transfektion och in vitro packning? (överföring av fager till bakterier) |
Transfektion: påminner om transformation, skillnaden är att det är fag DNA som blandas med kompetenta celler (M13 kloningsvektor) In vitro packning: av gamma kloningsvektorer. Rekombinant fag DNA blandas med head and tail proteiner. De bildade fagpartiklarna får infektera celler, dessa celler sprids sedan på plattor, efter inkubation framträder plack |
|
|
Hur fungerar transfektion och in vitro packning? (överföring av fager till bakterier) |
Transfektion: påminner om transformation, skillnaden är att det är fag DNA som blandas med kompetenta celler (M13 kloningsvektor) In vitro packning: av gamma kloningsvektorer. Rekombinant fag DNA blandas med head and tail proteiner. De bildade fagpartiklarna får infektera celler, dessa celler sprids sedan på plattor, efter inkubation framträder plack |
|
|
Hur sker identifikation av rekombinanta fager? |
På x-gal plattor; blå respektive vita plack |
|
|
Ge exempel på genetiskt framställda läkemedel? |
Insulin Tillväxthormon Interferon |
|
|
Ge exempel på genetiskt framställda vacciner |
Hepatit B Malaria |
|
|
Ge exempel på olika tillämpningsområden för genteknik |
Genetiskt framställda läkemedel Genetiskt framställda vacciner Miljöbioteknik; avfallshantering, vattenrening, marksanering Diagnostik; ärftliga sjukdomar, infektionssjukdomar Genterapi; behandling av sjukdomar som orsakas av enstaka defekta gener, ex cystisk fibros, muskeldystrofi Genetiskt modifierade organismer |
|
|
Vad är terapeutisk kloning? |
Genererar embryonala stamceller Arvsmassa (från en vuxen individ) förs in i en obefruktad äggcell Stamceller utvinns i blastocytstadiet Stamcellerna odlad i näringslösning = blir kroppsceller Kan transplantera dessa till ex. en skadad vävnad hos en patient |
|
|
Vad är reproduktiv kloning? |
Det görs för att föda fram en med givaren identisk individ Donatorcell tas från får (endast cellkärnan) En äggcell tas från ett annat får, tillsätter kärnan från det tidigare fåret Cellen delar sig = embryo Embryo placeras i livmodern på ett får |
|
|
Vad är CRISPR/Cas9? |
En genomredigeringsteknik, används för att göra riktade förändringar i arvsmassan (ex. byta ut baspar) Kan korrigera en sjukdomsgen eller föra in en gen på bestämd plats i arvsmassan |
|
|
Gentekniknämnden |
De främjer en etiskt försvarbar och säker användning av gentekniken så att människor och djurs hälsa och miljö skyddas |
|
|
Nämn några medicinsk-etiska regelverk |
Hälso- och sjukvårdslagen; patientens självbestämmande och om respekt för människors lika värde inom hälso- och sjukvården Patientsäkerhetslagen; skyldigheter för hälso- och sjukvårdspersonal Lagen om genetisk integritet; reglerar genetisk undersökning och information inom hälso- och sjukvården (fosterdiagnostik, genterapi mm) |
