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10 Cards in this Set
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EL LABORATORIO DE BIOLOGÍA MOLECULAR |
La técnica básica que se lleva a cabo en este laboratorio es la reacción de cadena de polimerasa (PCR) Es una técnica que nos permite, a partir de una cantidad mínima de ADN, obtener millones de copias iguales de esta. |
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EL EQUIPAMIENTO |
Hay dos tipos de equipamientos: * Equipamiento específico * Equipamiento genérico |
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EQUIPAMIENTO ESPECÍFICO: |
Permite realizar las técnicas exclusivas. Consta de:- termociclador.- electroforesis.- documentador de geles.También forman parte de este equipamiento (aparatos automáticos necesarios para procesos específicos):- extracción de ácidos nucleicos. - La secuenciación de los fragmentos que son objeto de estudio. |
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TERMOCICLADOR |
Es el aparato en el que se lleva a cabo la PCR. Permite realizar secuencialmente un número elevado de ciclos repetitivos programables con temperaturas diferentes y distintos tiempos de incubación, controlados por un microprocesador. Las partes más destacables son: * bloque incubador. * tapa de bloque incubador. |
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BLOQUE INCUBADOR |
Es la parte más importante. Es un soporte metálico, con múltiples pocillos para colocar los tubos de reacción de PCR. Capaz de mantener de manera homogénea, todo su volumen, durante los tiempos que se requiera, las distintas temperaturas que se programan para cada fase y en cada uno de los ciclos de PCR. El rango de temperaturas normalmente va de 4°C a 96°C. Los distintos modelos de termocicladores que existen se diferencian principalmente en la tecnología que utilizan para calentar y enfriar este bloque: * Sistemas de aire caliente o frío. * Materiales semiconductores... con el efecto peltier. |
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TAPA DE BLOQUE INCUBADOR |
Es una tapa termostatizada a 102-105°C que, una vez cerrada, entra en contacto directo con la tapa de los tubos de reacción. Esto evita que el agua de la mezcla de PCR se evapore y condense en la tapa, más fría, con la consiguiente concentración de los reactivos en la mezcla que alteraría el desarrollo de la reacción. |
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TERMOCICLADOR A TIEMPO REAL |
Incorpora un sistema láser y detección de fluorescencia capaz de excitar y medir la fluorescencia emitida por cada tubo de reacción individualmente. Esta tecnología permite detectar la síntesis de productos de amplificación en tiempo real. |
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EL EQUIPO DE ELECTROFORESIS |
Sirven para separar moléculas de ácidos nucleicos de distintos tamaños, aplicando un campo eléctrico en una disolución disolución tampón (pH7,5-7,8) Migran con mayor o menor velocidad a través de la matriz en función de la carga neta que poseen, su tamaño y su conformación tridimensional. La matriz que se utiliza es un gel de agarosa o bien de poliacrilamida. Dependerá del tamaño de las moléculas. El equipamiento de electroforesis, consta de: *soporte plástico o <camas> donde solidificar el gel. *cubeta de electroforesis. Se compone de: - un soporte para la "cama" con el gel. - dos zonas de depósito de tampón de electroforesis en cada uno de los extremos. . - electrodos positivo y negativo en cada extremo.*fuente de alimentación; que suministre corriente eléctrica continua a la cubeta de electroforesis. Debe permitir seleccionar voltaje o amparaje y graduar su intensidad. electrodos positivo y negativo en cada extremo.*fuente de alimentación; que suministre corriente eléctrica continua a la cubeta de electroforesis. Debe permitir seleccionar voltaje o amparaje y graduar su intensidad. *fuente de alimentación; que suministre corriente eléctrica continua a la cubeta de electroforesis. Debe permitir seleccionar voltaje o amparaje y graduar su intensidad. |
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DOCUMENTADOR DE GELES |
Es un equipo que permite visualizar las bandas de ácidos nucleicos en el gel después de la electroforesis y obtener una fotografía de él. Este equipo consta de: * Transiluminador: es una fuente de luz ultravioleta situada por debajo de una superficie transparente al UV donde se coloca el helio. Cuando la luz UV ilumina el gel, el agente intercalante emite fluorescencia. * Cámara fotográfica: La visualización del gel se realiza con una cámara fotográfica adecuada para trabajar con luz UV y controlada. |
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EQUIPAMIENTO GENÉRICO |
* Cabina de bioseguridad. * Sistema de purificación. * Espectrofotómetro. * Microscopio de luz transmitida y fluorescencia. * autoclave. * Incubador o estufa. * Baño termostático, termobloque y placa calefactora. * Centrífuga y microcentrífuga. * Neveras y congeladores de -20°C y -80°C. * Otros equipamientos. |
