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3 étapes pour isolement des cellules à partir d’un tissu
- dissociation mécanique
- dissociation enzymatique pour obtenir des cellules isolées
-> pour les cellules de la MEC on tulise des enzymes protéolytiques (trypsine, une peptidase du suc pancréatique)
- >pour les cellules de jonction, on utilise des agents chélateurs du Ca2+ (EDTA)
- identifier les cellules et enrichir les différentes populations cellulaires grâce aux propriétés physiques, en utilisant les anticorps spécifiques, par microdissection laser
Culture milieux classiques : composition
Température à 37°, substances nutritives élémentaire (Eau, acide aminé, glucose, vitamines, sel, Ions, oligo élément) SVF (hormones, facteurs de croissance, protéines, lipides
Culture cellulaire milieux chimiquement définis sans svf (composition)
Substances nutritives de base, insuline, transfert in, albumine, FC comme : EGF, NGF, IL-2
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